尊龙凯时哺乳动物蛋白提取试剂盒

来源:秦瑾斌日期:2025-02-28

尊龙凯时的哺乳动物蛋白提取试剂盒能够为您的实验提供高效的解决方案。试剂盒由以下成分组成：

尊龙凯时哺乳动物蛋白提取试剂盒

保存条件：试剂盒可在常温下保存，Protease inhibitor cocktail需存放于-20°C，保质期长达24个月。

提取步骤

根据5X Buffer、5X NaCl、5X SDS、5X DOC和5X NP-40按1:1:1:1:1（v/v）比例配制细胞裂解缓冲液。每1ml的细胞裂解缓冲液适用于提取106至107个细胞或5至20mg组织的蛋白质。使用前需加入10μl的Protease inhibitor cocktail。

根据细胞类型，选择以下方法：

对于贴壁细胞：去除细胞中的生长培养基，用PBS缓冲液冲洗细胞两次，接着加入细胞裂解缓冲液（106至107个细胞/ml），在冰袋中孵育30分钟，并多次重悬细胞，最后刮取并收集裂解液。
对于悬浮细胞：在700xg下离心5分钟，弃去上清液。使用PBS重悬细胞并洗涤两次，在4°C下离心去除上清液后，将沉淀重悬于细胞裂解缓冲液（106至107个细胞/ml），同样在冰袋中孵育30分钟。
对于组织：将组织切成小块，用PBS冲洗两次并加入细胞裂解缓冲液（5至20mg组织/ml）。将样品转移到预冷的微量匀浆器中，均匀化组织30至50次，保障均质过程对靶蛋白的功能完整性。

在4°C下以12,000xg离心裂解的细胞10分钟以沉淀细胞碎片，或者高转速离心（100,000xg，45分钟）制备蛋白质溶液。

将含有蛋白质的上清液移至冷冻管中，可在冰上保存以供立即使用，或将其转存于-70°C以备后用。

使用尊龙凯时的哺乳动物蛋白提取试剂盒，您将享受到高效便捷的实验体验，确保每一次提取都能达到理想结果。